Informe
epidemiológico Virus del Nilo al 15 de mayo
de 2006
El SENASA a través de la Dirección Nacional de Sanidad
Animal informa que al 15 de mayo de 2006, se han detectado y confirmado solo
tres casos de equinos positivos a Virus del Nilo por el método de Reacción
en cadena de la polimerasa (RT- PCR), inicialmente se puede afirmar que
la enfermedad se presenta con una muy baja morbilidad e insignificante infección serológica, no habiéndose
detectado casos clínicos en las personas que desarrollan funciones en los
establecimientos afectados.
La sintomatología clínica en el primer equino se
evidenció el día 4 de febrero, y posteriormente el 13 de febrero es reportado
una segunda sospecha, ambas en dos equinos residentes en sendos haras ubicados
en el partido de San Antonio de Areco, provincia de Buenos Aires.
La confirmación diagnóstica
referida a la detección de Virus
del Oeste del Nilo (VON), fue comunicada al Servicio Nacional de Sanidad y
Calidad Agroalimentaria (SENASA) el día 21 de abril por parte del Instituto
Nacional de Enfermedades Virales Humanas “Dr., Julio l. Matztegui”, centro
nacional de referencia para el diagnóstico de Dengue y otros Arbovirus, ubicado
en Pergamino, provincia de Buenos Aires, que depende de la Administración
Nacional de Laboratorios e Institutos de Salud (ANLIS).
Cabe advertir que entre el inicio del evento y la
confirmatorios del hallazgo se debió a la necesidad de haberse efectuar
previamente los diagnósticos de las enfermedades existentes en el país, rabia
y otras encefalitis, y ante los diagnóstico negativos encontrados, se comenzó
la investigación para Virus del Nilo.
Predios y Equinos
Afectados:
Se detectaron inicialmente,
en dos predios, ubicados en San Antonio de Areco,
Provincia de Buenos Aires, en cada predio solo un equino evidenció
sintomatología nerviosa. En el primero de ellos
un haras, el equino, una yegua con cría al pie, evidenció sintomatología
neurológica el 4 de febrero y murió
el mismo día por la tarde, se efectuó necropsia, extrayéndose muestras de
cerebro, cerebelo y sangre, esta última extraída con anterioridad a la muerte.
En el segundo haras el equino murió el
13 de febrero, presentando ataxia, del tren posterior y estado de shock,
se realiza la necropsia, se extrae el cerebro y se entierran los restos. Entre
ambos establecimientos existe una distancia mayor a los 20 Km.
La población equina es de 343 ejemplares en el primero
y de 298 en el segundo haras,
ambos predios dedicados a la producción de Equinos Sangre Pura de Carrera.
En el tercer caso se detectó el 27 de febrero en el hipódromo
de San Isidro en una potranca de 2 años, con origen en Victoria, provincia de
Entre Ríos, la que había sido trasladada
el 20 de ese mes, y que murió el 2 de marzo. El predio de origen se encuentra
en el Rincón de Nogoya, en este predio la población equina total es de 28
animales.
El estudio epidemiológico restrospectivo en estos
predios permitió comprobar que desde el inicio no fueron constatados otros
casos clínicos en equinos, ni tampoco se comprobó mortandad inusual de aves en la región, ni presencia de síntomas
compatibles entre el personal residente en los tres predios.
Como parte de las acciones
epidemiológicas, fueron extraídas 669 muestras de los tres predios (343, 298 y
28 respectivamente) para prueba de IgM, de las
que resultaron solo un positivo en cada predio de Areco de acuerdo al
Laboratorio del INTA.
Los tres predios se mantuvieron
en cuarentena y fueron liberados de la misma una vez obtenidos los resultados
diagnósticos.
Secuencia
diagnóstica:
Se
procedió al aislamiento viral en cultivos celulares de la línea VERO e
identificación viral por:
a)
lnmunofluorescencia indirecta con el empleo de anticuerpos monoclonales
para virus del Nilo Occidental (WN) y virus de la Encefalitís de San Luis (SLF)
líquidos ascíticos híperinmunes para los virus de la Encefalitis Equina del
Este (EEE), Encefalitis Equina del Oeste (WEE) y Encefalitis Equina Venezolana
(VEE).
b) RT~PCR: utilizando 3 sets de primers específicos
paralos virus WN y un par de primers para SLE.
Resultados
obtenidos:
Observación
de efecto citopatogénico en el segundo pasaje en una de las tres muestras.
La identificación viral, se realizó por Inmunofluorescencia Indirecta:
Resultado positivo para virus del Nilo(VNO). Se
obtuvieron resultados negativos para los virus de la Encefalitis de San Luis
(SLE), líquidos ascíticos hiperinmunes para los virus de la Encefalitis Equina
del Este (EEE), Encefalitis Equina del Oeste (WEE) y Encefalitis Equina
Venezolana (VEE).
Posteriormente se realizó la Reacción en cadena de la
polimerasa (PCR): arrojando resultado positivo para Virus del Nilo(VNO)
Caracterización
genética de virus del Nilo(VNO): Fragmentos de DNA amplificados por RT-PCR
utilizando primers específicos
para virus West Níle, correspondientes al aislamiento viral de cerebro del
equino, se realizó por el Método de Secuenciación nucleotídica de los
fragmentos de DNA amplificados mediante la técnica de secuenciación automática
“dydeoxy’ utilizando los mismos primers usados en la amplificación por PCR.
Se secuenciaron dos fragmentos
a)
Un fragmento de 408 nucleótidos correspondientes al gen del virus del
Nilo que codifica para la proteína pre-mernbrana
b)
Un fragmento de 302 nt correspondientes al gen del virus del Nilo que
codifica para la proteína NS5.
El análisis
de las secuencias obtenidas tornando como referencia la base de datos de NCBI,
por medio del buscador BLAST~ (Basic Local Alignment Search TooI) indicó una
identidad de las secuencias nucleotídicas en ambos fragmentos del orden del
98%-99% con las cepas de virus del Nilo circulantes en América.
Vigilancia
Epidemiológica:
Antecedentes:
Cabe mencionar que en el laboratorio INTA, se procesaron
además 11 sueros provenientes de muestras tomadas con anterioridad entre el mes
de octubre de 2005 y abril de 2006, en equinos en los que se había observado síntomas
neurológicos, , habiendo resultado en su totalidad, negativos a la prueba ELISA
IgM para Virus del Nilo.
Sospechas:
En una cabaña cita
en Olavarría, Provincia
de Buenos Aires, sobre un total de 229 equinos, el 20 de marzo, se
detectaron tres equinos con sintomatología nerviosa, de los cuales mueren dos.
Los resultados de laboratorio arrojaron diagnóstico negativo a la prueba de Ig
M específicos para Virus del Nilo en su totalidad. Según la encuesta realizada
no se observó mortandad inusual de aves ni reporte de casos humanos.
En la provincia de San Juan en un predio con 27 caballos,
se observó sintomatología en uno que luego murió, la serología de la
totalidad arrojó resultado negativo. En este caso tampoco fueron observadas
muerte de aves o casos humanos.
En Pilar (Prov. de Buenos Aires), sobre un total de 10
caballos, uno presentó sintomatología nerviosa, muriendo luego, y similar
situación se constató en Campo de Mayo (Prov. de Buenos Aires) en el que sobre
4 caballos uno enfermó y murió. La serología de la totalidad de las muestras
de ambos predios arrojó resultado negativo a VNO.
Relevamiento en
cuarentenas:
Muestras de suero proveniente de 149 equinos alojados en
tres predios utilizados como cuarentenarios para exportación, fueron procesados
resultando negativas a la prueba de ELISA de Captura Ig M.
Relevamiento
Serologico:
Cabe destacar que, dentro de las acciones de vigilancia
epidemiológica y en el marco de
colaboración entre el Instituto Maiztegui y el SENASA, en el transcurso de los
meses octubre a diciembre del año 2005, se llevó a cabo un relevamiento serológico
en equinos residentes en 17 áreas estratégicas del país que constituyen
ambientes naturales para las aves migratorias que arriban al país. En ellos
fueron extraídas 1275 muestras equinas que se encuentran en la etapa final de
procesamiento y que aportarán una valiosa información retrospectiva respecto
de la actividad del VON y otros arbovirus igualmente zoonóticos (Ilheus,
Bussuquara, San Luis, Este, Oeste y Venezuela).
Síntesis:
Hasta la fecha, los resultados diagnósticos encontrados
en los distintos predios que presentaron casos o sospechas clínicas en equinos,
el hecho de no haberse notificado u observado signos compatibles entre el
personal residente en esos establecimientos, habiéndose efectuado las
comunicaciones del caso al
Ministerio de Salud y Ambiente de la Nación, como así también que no se hayan
registrado notificaciones de mortandad inusual de aves en esas zonas, a pesar de
la alta sensibilización existente por la gripe aviar, indican una infección
insignificante o inexistente.
Con respecto a las exportaciones de equinos vivos se
continúan normalizando, con el previo acuerdo de las condiciones y
requerimientos de certificación ofrecido por el SENASA por parte de los países
compradores.